A549細胞的培養(yǎng)
A549細胞為人肺腺癌細胞，屬于傳代細胞系，可穩(wěn)定地傳代培養(yǎng)。一般用胰酶消化后，加入生長液稀釋，以1：2～1：3傳代培養(yǎng)都是可行的。
一、[所需溶液]
1，細胞沖洗液：磷酸鹽緩沖液(PBS)——無Ca、Mg
NACL8.00g；
KCL0.20g;
KH2PO40.20g;
Na2HPO4.。12H2O1.15g
加水至1000mL,將PH調(diào)至7.4，高壓滅菌。
2，消化液
（1）胰酶-PBS
結(jié)晶胰酶2.5g;
高壓滅菌后的PBS1000ml
用磁力攪拌器攪拌均勻，使其*溶解，通過0.22μm的濾膜過濾除菌，分裝備用，放置—20℃保存。
（2）胰酶—EDTA:
結(jié)晶胰酶0.5g;
EDTA鹽溶液0.2g
無Ca、MgPBS1000ml
用磁力攪拌器攪拌均勻，使其*溶解，通過0.22μm的濾膜過濾除菌，分裝備用，放置—20℃保存。
1，細胞培養(yǎng)液：RPMI1640培養(yǎng)液
配制方法：
（1）將一袋干粉型RPMI1640培養(yǎng)基溶于900ml三蒸水中，沖洗包裝袋兩至三次倒入培養(yǎng)液中。
（2）加入丙酮酸鈉0.1g，NaHCO22g以及雙抗，加入磁力攪棒并置于磁力攪拌器上充分攪拌。雙抗的配置濃度為100U/ML青霉素和100U/ML鏈霉素。(一般市售的青霉素為80萬U/瓶，將其溶解于4ml三蒸水中，每升培養(yǎng)液中加入0.5ml；市售的鏈霉素為100萬U/瓶，將其溶解于5ml三蒸水中，每升培養(yǎng)
