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          上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司

          血漿游離血紅蛋白測(cè)定方法
          點(diǎn)擊次數(shù):1595 更新時(shí)間:2016-06-27
            分析:血漿游離血紅蛋白測(cè)定方法
            
            ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
            
            血紅蛋白具有類過(guò)氧化物酶活性,可催化H2O2釋放新生態(tài)氧,使鄰甲聯(lián)苯胺氧化發(fā)生顏色變化,由無(wú)色zui終變?yōu)樗{(lán)紫色。根據(jù)顯色深淺與標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較,可測(cè)出其含量。
            
            實(shí)驗(yàn)方法
            
            材料:
            
            1.2g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液
            
            2.1%H2O2
            
            3.10%醋酸溶液
            
            4.分光光度計(jì)
            
            方法:
            
            1.抽取靜脈血2-3ml,枸櫞酸鈉抗凝,離心分離血漿。
            
            2.按下表進(jìn)行操作,用分光光度計(jì),波長(zhǎng)為530nm,以空白管調(diào)零,測(cè)定測(cè)定管的吸光度。
            

          試劑 (ml)

          測(cè)定管

          空白管

          2 g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液

          0.5

          0.5

          患者血漿

          0.02

          /

          1% H2O2

          0.5

          0.5

          混勻后室溫放置10min

          10%醋酸溶液

          5.0

          5.0

          室溫放置10min

            
            3.計(jì)算公式
            
            血漿游離Hb(mg/L)=測(cè)定管吸光度/標(biāo)準(zhǔn)管吸光度×100
            
            實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算
            
            參考范圍:0-40mg/L
            
            注意事項(xiàng)
            
            1.一切容器避免血紅蛋白污染;
            
            2.采血要順利,器皿要干燥,檢測(cè)血漿要新鮮,及時(shí)分離,防止人為溶血;
            
            3.鄰聯(lián)苯胺溶液具致癌性,檢測(cè)時(shí)要小心,廢液要妥善處理,以免污染;
            
            4.雙氧水要新鮮配置,濃度要準(zhǔn)確
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