常用的細(xì)胞染色方法有：
1、簡(jiǎn)單染色法，常用堿性染料如美藍(lán)等進(jìn)行簡(jiǎn)單染色；
2、革蘭氏染色法，主要包括結(jié)晶紫初染、碘液媒染、乙醇(或丙酮)脫色以及番紅復(fù)染四個(gè)過(guò)程；
3、瑞氏染色法，瑞氏染料溶劑主要是由伊紅美藍(lán)組成；
4、吉姆薩染色法，吉姆薩染色原理與結(jié)果和瑞特染色法基本相同；
5、細(xì)胞免疫熒光染色法，免疫熒光染色的主要原理是利用抗原抗體之間的特異性結(jié)合。
染色是生物顯微玻片標(biāo)本制作中最重要的環(huán)節(jié)之一。先把破壞細(xì)胞膜的選擇透過(guò)性，再使用染色劑，將生物組織浸入染色劑內(nèi)，使組織細(xì)胞的某一部分染上與其他部分不同的顏色或深度不同的顏色，產(chǎn)生不同的折射率，以便觀察。
另外，銀染法也較常用。當(dāng)組織塊浸入硝xiao酸銀溶液中時(shí)，有的組織結(jié)構(gòu)能直接把硝xiao酸銀還原，使銀粒附于其上，呈棕黑色或棕黃色。有些結(jié)構(gòu)本身對(duì)硝xiao酸銀無(wú)直接還原能力，若加入還原劑，可使硝xiao酸銀還原沉淀顯色。
細(xì)胞染色注意事項(xiàng)：
1、細(xì)胞染色部位
細(xì)胞表面染色
胞內(nèi)抗原染色
同時(shí)標(biāo)記胞膜和胞內(nèi)抗原
單色標(biāo)記
多色標(biāo)記
2、細(xì)胞表面標(biāo)記
表面抗原也可能表達(dá)于細(xì)胞內(nèi)
染色細(xì)胞表面標(biāo)記的細(xì)胞一定是活的未標(biāo)記細(xì)胞
親細(xì)胞抗體的存在，使染色復(fù)雜。可用洗滌白細(xì)胞的方法，或在不含離子的緩沖液中37C孵育1小時(shí)，可有效去除親細(xì)胞抗體
Fc受體，可以加外源性免疫球蛋白阻斷或采用同型對(duì)照
3、細(xì)胞內(nèi)標(biāo)記
對(duì)細(xì)胞打孔，使單抗可以進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，同時(shí)又不破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的完整性
一般來(lái)說(shuō)，進(jìn)行胞內(nèi)抗原染色時(shí)不能同時(shí)檢測(cè)細(xì)胞的活性，除非用EMA標(biāo)記
檢測(cè)某一抗原是否表達(dá)，以及對(duì)抗原進(jìn)行表達(dá)定位時(shí)，檢測(cè)同一標(biāo)本的胞膜和胞漿抗原要分開(kāi)進(jìn)行。
對(duì)于某些核酸染料（如DAPI、TO、AO等）為活胞染料，無(wú)需固定或透膜
4、同時(shí)檢測(cè)胞膜和胞內(nèi)抗原
對(duì)表面標(biāo)志、胞內(nèi)抗原、DNA含量可任意組合同時(shí)分析 。
染色步驟是：細(xì)胞表面標(biāo)志--固定--細(xì)胞打孔--胞內(nèi)抗原--DNA含量 。
需要認(rèn)識(shí)到的是，用于固定和打孔試劑的多重影響，有些條件適合某一參數(shù)而對(duì)別的參數(shù)可能非常不合適。
每一步熒光染料的選擇與抗體的選擇一樣重要。對(duì)細(xì)胞表面標(biāo)記來(lái)說(shuō)，一種熒光染料一定不能被隨后的打孔方法或試劑所影響。對(duì)胞內(nèi)抗原檢測(cè)來(lái)講，熒光素分子要足夠小，可以穿透打孔后的細(xì)胞。
5、單色標(biāo)記
間接標(biāo)記時(shí)，可選擇單色標(biāo)記
6、多色標(biāo)記
考慮熒光信號(hào)之間的干擾。
細(xì)胞補(bǔ)償、微球補(bǔ)償
一些聯(lián)合使用的抗體會(huì)彼此阻礙與各自抗原的結(jié)合，比如通過(guò)空間位阻。因此，抗體組合使用前要與單色抗體標(biāo)記的結(jié)果做比較。
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