上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司

    上海遠(yuǎn)慕為您提供人血管生成素2（ANG-2）ELISA試劑盒說明書，我司是經(jīng)銷生物科學(xué)領(lǐng)域的供貨商，自公司成立以來，企業(yè)規(guī)模迅速發(fā)展中，生產(chǎn)加工和銷售的產(chǎn)品包括各種化學(xué)試劑、培養(yǎng)基、各種ELISA試劑盒、標(biāo)準(zhǔn)品等5萬余種類。在業(yè)內(nèi)有*好評(píng)，咨詢！

    產(chǎn)品中文名：人血管生成素2（ANG-2）ELISA試劑盒

    別名：人血管生成素2（ANG-2）ELISA Kit

    供貨商：上海遠(yuǎn)慕

    規(guī)格：96T/48T

    保存：2-8℃

    試劑盒成分：酶標(biāo)板，試劑，標(biāo)準(zhǔn)品等

    樣本：血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。

    預(yù)期應(yīng)用：ELISA法定量測(cè)定血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。

    Elisa試劑盒特點(diǎn)：靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好。

    應(yīng)用領(lǐng)域：僅供科研使用，不得用于醫(yī)學(xué)診斷

    檢測(cè)目的：用于測(cè)定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本

    操作步驟：

    1. 編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照2 孔、陽性對(duì)照2 孔、空白對(duì)照1孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）。

    2. 加樣：分別在陰、陽性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽性對(duì)照 50μl。然后在待測(cè)樣品孔先加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測(cè)樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

    3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。

    4. 配液：將20倍濃縮洗滌液加蒸餾水至600ml后備用。

    5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

    6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

    7. 顯色：每孔先加入顯色劑A 50μl，再加入顯色劑B 50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15 分鐘。

    8. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

    9. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

    人血管生成素2（ANG-2）ELISA檢測(cè)試劑盒檢測(cè)中樣品的處理

    1.細(xì)胞培養(yǎng)物上清：

    細(xì)胞培養(yǎng)物于室溫1000g，離心10分鐘后收集上清，并將標(biāo)本保存于-20℃，且應(yīng)避免反復(fù)凍融。

    2.血清：

    標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜后于1000g，4℃離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

    3.血漿：

    可用EDTA或肝素作為抗凝劑標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃，1000g離心15分鐘，或?qū)?biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

    4.尿液：

    無菌收集取初尿，離心除去沉淀物，即可用于檢測(cè)，要長(zhǎng)期保存尿樣，可以加入0.05％的NaN3在4-8℃保存，或加入尿樣冰凍保護(hù)液放入-20℃冰箱長(zhǎng)期保存。

    5.組織勻漿：

    將組織標(biāo)本先用PBS洗滌，除去多余血液，勻漿化后放在PBS于-20℃放置過夜，再經(jīng)過二次反復(fù)凍融破膜，5000g，4℃離心5分鐘，取上清即可檢測(cè)。

    操作常見問題解析：

    1.加樣？

    在現(xiàn)在的ELISA商品試劑盒中，必然有使用微量加樣器加入樣本的步驟。注意的關(guān)鍵點(diǎn)是：加樣不可太快，要避免加在孔壁上部，不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快，無法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū)，易導(dǎo)致非特異吸附。濺出會(huì)對(duì)鄰近孔產(chǎn)生污染。出現(xiàn)氣泡則反應(yīng)液界面有差異。所以，有時(shí)候一份標(biāo)本用相同的試劑盒這次測(cè)定為陽性，下次測(cè)定為陰性，往往就是上述加樣及試劑的錯(cuò)誤所致。

    2.邊緣效應(yīng)

    使用96孔板的ELISA測(cè)定中，常發(fā)現(xiàn)有“邊緣效應(yīng)"，即外周孔顯色較中心孔深。經(jīng)研究證實(shí)在溫育中的熱力學(xué)梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身為不良熱導(dǎo)體，在實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)ELISA測(cè)定中，將板從室溫（通常在25℃左右）置于37℃溫箱，板也升溫時(shí)，在外周孔與中心孔之間可能存在一熱力學(xué)梯度。因此使用水浴或在將反應(yīng)溶液加入至板孔中時(shí)，將板和溶液均加熱至溫育溫度（如37℃），就可以很容易地排除“邊緣效應(yīng)"，并且可提高測(cè)定的重復(fù)性。

    人血管生成素2（ANG-2）ELISA檢測(cè)試劑盒相關(guān)產(chǎn)品：

    大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1（PAI-1）ELISA試劑盒

    大鼠纖溶酶原激活物抑制因子（PAI）ELISA試劑盒

    大鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物（FDP）ELISA試劑盒

    大鼠血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）ELISA試劑盒

    大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子（PDGF）ELISA試劑盒

    大鼠氧化低密度脂蛋白（OxLDL）ELISA試劑盒

    大鼠血小板活化因子（PAF）ELISA試劑盒

    大鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽（PⅢNT）ELISA試劑盒

    大鼠Ⅲ型膠原（Col Ⅲ）ELISA試劑盒

    大鼠C反應(yīng)蛋白（CRP）ELISA試劑盒

    大鼠組織因子（TF）ELISA試劑盒

    大鼠血小板因子4（PF-4/CXCL4）ELISA試劑盒

    大鼠結(jié)締組織生長(zhǎng)因子（CTGF）ELISA試劑盒